Découvrez le clonage de gènes et les vecteurs

Quand les généticiens utilisent de petits fragments d'ADN pour cloner un gène et créer un organisme génétiquement modifié (OGM), cet ADN s'appelle un vecteur.

Ce que les vecteurs ont à faire avec les gènes et le clonage

Dans le clonage moléculaire, le vecteur est une molécule d'ADN qui sert de support au transfert ou à l'REPLACEion de gènes étrangers dans une autre cellule. et / ou exprimé. Les vecteurs sont parmi les outils essentiels pour le clonage de gènes et sont plus utiles s'ils codent également une sorte de gène marqueur codant une molécule bioindicatrice qui peut être mesurée dans une évaluation biologique pour assurer leur REPLACEion et leur expression dans l'organisme hôte.

En particulier, un vecteur de clonage est un ADN prélevé sur un virus, un plasmide ou des cellules (d'organismes supérieurs) à insérer avec un fragment d'ADN étranger à des fins de clonage. Puisque le vecteur de clonage peut être maintenu de manière stable dans un organisme, le vecteur contient également des caractéristiques qui permettent l'REPLACEion ou l'élimination appropriée de l'ADN. Après avoir été cloné dans un vecteur de clonage, le fragment d'ADN peut être encore sous-cloné dans un autre vecteur qui peut être utilisé avec encore plus de spécificité.

Dans certains cas, les virus sont utilisés pour infecter les bactéries. Ces virus sont appelés bactériophages, ou phages, pour faire court. Les retrovirus sont d'excellents vecteurs pour introduire des gènes dans des cellules animales. Les plasmides, qui sont des morceaux d'ADN circulaires, sont les vecteurs les plus couramment utilisés pour introduire de l'ADN étranger dans des cellules bactériennes. Ils portent souvent des gènes de résistance aux antibiotiques qui peuvent être utilisés pour tester l'expression de l'ADN plasmidique, sur des boîtes de Pétri antibiotiques.

Le transfert de gènes dans les cellules végétales est couramment effectué en utilisant la bactérie du sol

Agrobacterium tumefaciens , qui agit comme un vecteur et insère un gros plasmide dans la cellule hôte. Seules les cellules contenant le vecteur de clonage vont croître lorsque des antibiotiques sont présents. Les principaux types de vecteurs de clonage

Les six principaux types de vecteurs sont:

Plasmide.

• ADN extrachromosomique circulaire qui se réplique de manière autonome à l'intérieur de la cellule bactérienne. Les plasmides ont généralement un nombre de copies élevé, tel que pUC19 qui a un nombre de copies de 500 à 700 copies par cellule. Phage.
• Molécules d'ADN linéaires dérivées du bacteriophage lambda. Peut être remplacé par de l'ADN étranger sans perturber son cycle de vie. Cosmides.
• Une autre molécule d'ADN extrachromosomique circulaire qui combine les caractéristiques des plasmides et des phages. Chromosomes artificiels bactériens.
• Basé sur des plasmides bactériens mini-F. Chromosomes artificiels de levure.
• C'est un chromosome artificiel qui contient des télomères (tampons jetables aux extrémités des chromosomes qui sont coupés pendant la division cellulaire) avec des origines de réplication, un centromère de levure (partie d'un chromosome qui relie les chromatides soeurs ou une dyade). un marqueur sélectionnable pour l'identification dans les cellules de levure. Chromosome artificiel humain.

• Ce type de vecteur est potentiellement utile pour la délivrance de gènes dans les cellules humaines, et un outil pour les études d'expression et la détermination de la fonction chromosomique humaine. Il peut transporter un très grand fragment d'ADN. Tous les vecteurs modifiés ont une origine de réplication (un réplicateur), un site de clonage (situé là où l'REPLACEion d'ADN étranger n'interrompt pas la réplication ou l'inactivation des marqueurs essentiels) et un marqueur sélectionnable (typiquement un gène résistant à un antibiotique.)