Vidéo: Préparation d'un tampon 2025
En six étapes faciles, apprenez à fabriquer un tampon au citrate de sodium. Le citrate de sodium ou le citrate trisodique peuvent tamponner les solutions dans la gamme de pH d'environ 3 à 6. 2. L'acide citrique peut également faire le travail.
Le tampon au citrate de sodium est utilisé pour l'isolement de l'ARN car il minimise l'hydrolyse de base des brins d'ARN. Ceci en fait une étape importante dans la purification de l'ARNm pendant la recherche génomique ou pour l'étude de la transcription.
Les tampons à base de citrate peuvent également aider à la détection d'antigènes dans les préparations de tissus fixes, car ils rompent les liaisons croisées entre les antigènes et les milieux de fixation.
Avec le guide ci-dessous, préparez un tampon au citrate de sodium de pH 6. Les instructions sont non seulement faciles mais rapides à exécuter. Cela ne devrait vous prendre que 10 minutes pour terminer ces étapes.
Deux options pour fabriquer le tampon
Il y a deux façons de fabriquer un tampon de citrate de sodium. D'abord, déterminez si vous avez à la fois l'acide citrique et la base conjuguée, le citrate de sodium, pour travailler avec. Si vous n'avez que de l'acide citrique, ce n'est pas un problème. Vous pouvez toujours faire le tampon.
D'un autre côté, si vous avez à la fois l'acide et la base, créez une solution mère de chacun. Mélanger 21 grammes d'acide citrique dans 1 litre d'eau distillée, et 29. 4 grammes de citrate de sodium dans 1 litre d'eau distillée.
Si vous n'avez que de l'acide citrique, mélangez 2,1 grammes dans un peu moins de 1 litre d'eau distillée et passez à l'étape suivante.
Mélange de solutions d'acide citrique et de citrate de sodium
Maintenant que vous avez créé votre solution mère (si vous aviez à la fois un acide et une base) ou mélangé votre acide dans de l'eau distillée, concentrez-vous sur vos solutions.
Mélanger 82 millilitres de la solution d'acide citrique avec 18 millilitres de la solution de citrate de sodium.
Ensuite, augmentez le volume total du mélange à un peu moins de 1 litre avec de l'eau distillée. Laisser suffisamment de volume pour permettre l'ajout d'hydroxyde de sodium (NaOH) dans l'étape suivante.
Réglage du pH
Tout en agitant doucement la solution à l'aide d'un agitateur magnétique, utilisez de l'hydroxyde de sodium 1M pour ajuster le pH du mélange à 6. 0. Ensuite, faites le volume final de la solution jusqu'à 1 litre avec eau distillée en utilisant une fiole jaugée.
Ce dont vous avez besoin pour fabriquer le tampon
Non seulement cela ne vous prendra pas beaucoup de temps pour fabriquer le tampon au citrate de sodium, mais vous n'aurez pas non plus besoin de beaucoup de matériaux pour cela. Avec de l'acide citrique, 1 M d'hydroxyde de sodium, de l'eau distillée et une sonde de pH étalonnée, vous serez à mi-chemin. L'utilisation du citrate de sodium est facultative.
La fabrication du tampon nécessite également un cylindre gradué de 1 litre, un flacon volumétrique de 1 litre et trois flacons de 1 litre. Enfin, vous aurez besoin d'une barre d'agitation magnétique et d'un agitateur magnétique.
Si vous n'avez pas tous ces documents, pensez à utiliser le laboratoire dans votre école ou sur votre lieu de travail, vous n'avez donc pas besoin de les acheter vous-même. Vous pouvez également facilement acheter ces documents en ligne ou visiter un magasin de produits spécialisés dans votre région.
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